SunRed 醋酸 細胞活性檢測是用于細胞活性檢測的試劑盒。酯酶可催化水解SunRed 乙酸鹽(SRA)產(chǎn)生Sun Red熒光基團,該熒光基團在633nm處可以被激發(fā),發(fā)射光波長在~660nm處。Sun Red熒光基團可以用Cy5濾光片檢測,大多數(shù)商業(yè)熒光儀器中都裝有Cy5濾光片。盡管Sun Red在633nm處被激發(fā),~660nm發(fā)出紅光;但是SRA在633nm處的光吸收很小,在沒有紅光發(fā)射的條件下,這使SRA成為最靈敏的NIR(近紅外)酯酶底物之一。在流行的熒光色彩應(yīng)用于其它細胞功能分析時,SRA提供另一種顏色用于可行性細胞的分析。SRA是一個非熒光性的疏水性化合物,它可以通過細胞膜,在細胞內(nèi)酯酶水解乙酸鹽基團作用下,產(chǎn)生高強度熒光的產(chǎn)物Sun Red。Sun Red分子在完整細胞膜結(jié)構(gòu)的細胞內(nèi)積累至產(chǎn)生足夠深的紅色熒光,因此可以用作細胞的標簽。細胞膜結(jié)構(gòu)不完整或者代謝活性弱的細胞,不能夠積累熒光產(chǎn)物,因此不顯現(xiàn)深色的紅色熒光。SRA可以與綠色熒光染料試劑(例如FITC或者Alexa Fluor 488標記的抗體)結(jié)合使用。
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
C0704 | SunRed 醋酸 細胞活性檢測 | 25 mg | 1236RMB |
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣,并在制備后儲存在-20°C。 避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 SunRed 醋酸鹽原液(2至10 mM)
準備2至10 mM的SunRed 醋酸鹽在DMSO中的儲備溶液。 應(yīng)立即使用原液。
2.工作溶液
SunRed 醋酸鹽工作溶液:
在實驗前,在含有20 mM Hepes緩沖液(HHBS)或您選擇的緩沖液的1X Hank鹽溶液中,以5至10μM制備SunRed 醋酸鹽工作溶液。
樣品分析
1.從細胞中取出培養(yǎng)基。
2.加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的SunRed 乙酸鹽工作溶液。
3.將SunRed 醋酸鹽工作溶液板在室溫或37°C下孵育1小時,避光。 適當(dāng)?shù)姆跤龝r間取決于所用的單個細胞類型和細胞濃度。 優(yōu)化每個實驗的孵育時間。 對于非粘附細胞,建議在孵育后以800rpm離心細胞板2分鐘。
4.監(jiān)測Ex / Em = 620 / 660nm處的熒光強度(截止640nm)。