Cell Meter 細(xì)菌活力檢測(cè)試劑盒是用于檢測(cè)細(xì)菌活力的試劑盒。該試劑盒使用我們的綠色熒光核酸染色MycoLight Green和紅色熒光核酸染色碘化丙啶的混合物。單獨(dú)使用時(shí)，MycoLight Green染色劑通常標(biāo)記人群中的所有細(xì)菌（活的和死的）。相比之下，碘化丙錠僅滲透膜受損的細(xì)菌，當(dāng)存在兩種染料時(shí)，導(dǎo)致MycoLight Green染色熒光減少。因此，使用MycoLight Green和碘化丙錠染料的適當(dāng)混合物，具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)菌發(fā)出綠色熒光，而具有受損膜的死亡或垂死細(xì)菌產(chǎn)生紅色熒光。 Mycolight 細(xì)菌活力檢測(cè)試劑盒是一種強(qiáng)大的工具，用于監(jiān)測(cè)細(xì)菌群體的活力，作為細(xì)胞膜完整性的函數(shù)?？梢栽?10-530nm（FITC濾光器）和600-660nm（德克薩斯紅色濾光器）下熒光測(cè)量染色細(xì)胞，激發(fā)波長(zhǎng)為最常見(jiàn)的激發(fā)光源488nm。

操作方法

溶液配制

染料工作溶液（250X）：
在微量離心管中加入等體積的MycoLight Green（組分A）和碘化丙啶（組分B）并充分混合。 注意：每次準(zhǔn)備新鮮的工作溶液。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

1.在任何適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌從對(duì)數(shù)期培養(yǎng)物中獲得健康細(xì)菌的最佳結(jié)果。在0.85％NaCl或適當(dāng)?shù)木彌_液中將細(xì)菌培養(yǎng)物稀釋至~106至108個(gè)細(xì)胞/ mL。準(zhǔn)備足夠的懸浮液，為流式細(xì)胞儀每次測(cè)試提供500μL，或?yàn)?6孔板提供每次測(cè)試100μL。注意：在染色細(xì)菌之前去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基的痕跡。單次洗滌步驟通常足以從細(xì)菌懸浮液中除去顯著痕量的干擾介質(zhì)組分。建議不要使用磷酸鹽清洗緩沖液，因?yàn)樗鼈儠?huì)降低染色效率。

2.向每mL細(xì)菌懸浮液中加入4μL染料工作溶液（250X）。充分混合并在室溫下孵育15分鐘。避光。

3.可以通過(guò)熒光顯微鏡，熒光酶標(biāo)儀或流式細(xì)胞術(shù)分析染色的細(xì)菌細(xì)胞。

4.來(lái)自活細(xì)菌和死細(xì)菌的熒光可以與任何標(biāo)準(zhǔn)熒光素長(zhǎng)通濾光片組同時(shí)觀察。或者，可以用熒光素和德克薩斯紅過(guò)濾器組分別觀察活的（綠色熒光的）和死的（紅色熒光的）細(xì)胞。